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Carro vacío

Pfu DNA polimerasa

 
Enzima DNA polimerasa con actividad proofreading.
 

Pfu DNA Polimerasa es una enzima termoestable con un peso molecular de 90 kDa, cataliza la polimerización de nucleótidos en dúplex de DNA en dirección 5’ – 3’, logrando productos de PCR blunt-end sin extremos 3’-dA. Exhibe actividad exonucleasa 3’-5’ (proofreading) que posibilita que la polimerasa corrija los nucleótidos polimerizados erróneamente y carece de actividad exonucleasa 5’-3’. Es recomendada para reacciones que requieren alta fidelidad cuando los fragmentos no superan los 3 kb. La tasa de extensión de la enzima es de 600bp/min en condiciones Standard. La temperatura de reacción apropiada es de 65 – 75 grados centígrados, la concentración de dNTPs recomendada es entre 100 – 300 uM, la concentración de magnesio es 2-3 mM y el pH óptimo es 8.1-9.1. La cantidad de enzima es 1-1.5 unidades para 20 microlitros y 2-3 unidades para 50 microlitros de reacción de PCR.

 
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